ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція) і ПЛР-Експрес - два основні методи, що використовуються в молекулярній біології для збільшення та аналізу ДНК. Методи ПЛР і ПЛР-Експрес мають багато спільного, але також і відрізняються один від одного.
ПЛР - це метод, що дозволяє ампліфікувати (збільшити кількість) певний фрагмент ДНК початкового зразка для подальшого його дослідження. Цей метод використовується в багатьох галузях біологічних досліджень, включаючи генетику, медицину, археологію та судову медицину.
Основний принцип ПЛР-Експрес полягає в тому ж процесі ампліфікації ДНК, але існують кілька ключових відмінностей. На відміну від звичайної ПЛР, ПЛР-експрес має більш швидкий і спрощений протокол, який дозволяє отримати результати протягом декількох годин. Цей метод широко використовується в клінічній діагностиці для швидкого виявлення та ідентифікації патогенних мікроорганізмів або генетичних мутацій.
Що таке метод ПЛР і ПЛР-Експрес?
ПЛР-експрес метод-це вид ПЛР, який розроблений для виконання швидкого і зручного аналізу зразків. Він заснований на тому ж основному принципі збільшення певної послідовності ДНК або РНК, що і класичний метод ПЛР, але з деякими суттєвими відмінностями.
Основна відмінність ПЛР-експрес методу полягає в часі, необхідному для проведення реакції. У той час як класичний метод ПЛР може займати кілька годин, ПЛР-Експрес проводиться за лічені хвилини або навіть секунди.
ПЛР-експрес метод використовується в багатьох областях науки і медицини, включаючи діагностику інфекцій, ідентифікацію генетичних захворювань, форензику, а також дослідження в області молекулярної біології і генетики.
Незважаючи на свою швидкість і зручність, ПЛР-експрес метод володіє високою чутливістю і специфічністю. Він може виявити навіть незначну кількість шуканого фрагмента ДНК або РНК у зразку, що робить його незамінним інструментом у дослідженнях та діагностиці різних захворювань.
Принцип роботи методу ПЛР
Принцип роботи ПЛР заснований на декількох основних етапах. Спочатку проводиться денатурація вихідної дволанцюжкової ДНК при високій температурі, що призводить до розділення двох ланцюжків ДНК і утворення окремих шаблонів. Потім відбувається анелювання специфічних коротких праймерів (коротких нуклеотидних послідовностей), які є комплементарними до ділянок ДНК цікавить нас гена.
На наступному етапі вступає в дію термостабільний фермент ДНК-полімераза, який подовжує кожен праймер, використовуючи вільні нуклеотиди, утворюючи нові ланцюги ДНК. Цей процес повторюється кілька разів в циклах з підвищенням і зниженням температури для забезпечення надійності і специфічності ампліфікації.
В результаті кожного циклу кількість початкової ДНК збільшується в два рази, що призводить до експоненціального зростання числа копій ділянки гена.
ПЛР-метод широко використовується в наукових і медичних дослідженнях, а також в практичній біології. Він дозволяє швидко і ефективно ампліфікувати гени, виявляти генетичні мутації, діагностувати інфекційні захворювання, визначати залишки генетичного матеріалу в археологічних знахідках і багато іншого.